Elektrophorese, was es ist, wofür es ist und wie es gemacht wird
Die Elektrophorese ist eine Labortechnik, die mit dem Ziel durchgeführt wird, Moleküle nach ihrer Größe und elektrischen Ladung zu trennen, damit die Diagnose von Krankheiten gestellt, die Proteinexpression verifiziert oder Mikroorganismen identifiziert werden können.
Die Elektrophorese ist ein einfaches und kostengünstiges Verfahren, das im Laboralltag und in Forschungsprojekten eingesetzt wird. Je nach Zweck der Elektrophorese kann es beispielsweise erforderlich sein, andere Tests und Untersuchungen durchzuführen, um eine Diagnose zu erhalten.
Wofür ist es?
Die Elektrophorese kann sowohl in Forschungsprojekten als auch in der Diagnose für verschiedene Zwecke durchgeführt werden, da es sich um eine einfache und kostengünstige Technik handelt. Somit kann eine Elektrophorese durchgeführt werden, um:
- Identifizieren Sie Viren, Pilze, Bakterien und Parasiten, wobei diese Anwendung in Forschungsprojekten häufiger vorkommt.
- Vaterschaftstest;
- Überprüfen Sie die Expression von Proteinen;
- Identifizieren Sie Mutationen, die beispielsweise bei der Diagnose von Leukämie hilfreich sind.
- Analyse der Arten von zirkulierendem Hämoglobin, die bei der Diagnose von Sichelzellenanämie hilfreich sind;
- Bewerten Sie die Menge der im Blut vorhandenen Proteine.
Je nach Zweck der Elektrophorese kann es erforderlich sein, andere ergänzende Tests durchzuführen, damit der Arzt die Diagnose abschließen kann.
Wie es gemacht wird
Für die Elektrophorese ist zusätzlich zu einem UV- oder LED-Lichtgerät, das auch als Transilluminator bekannt ist, das Gel erforderlich, das je nach Objektiv aus Polyacrylamid oder Agarose, Elektrophoresepuffer und -behälter, Molekulargewichtsmarker und einem fluoreszierenden Farbstoff bestehen kann.
Nach der Herstellung des Gels muss ein bestimmtes Objekt platziert werden, damit die Vertiefungen im Gel, im Volksmund Kamm genannt, hergestellt werden, und das Gel aushärten lassen. Wenn das Gel fertig ist, tragen Sie die Substanzen einfach auf die Vertiefungen auf. Dazu muss ein Molekulargewichtsmarker in eine der Vertiefungen gegeben werden, eine Positivkontrolle, bei der es sich um die Substanz handelt, die bekannt ist, eine Negativkontrolle, die die Gültigkeit der Reaktion garantiert, und die zu analysierenden Proben. Alle Proben müssen mit einem fluoreszierenden Farbstoff gemischt werden, da auf diese Weise die Banden auf dem Transilluminator sichtbar gemacht werden können.
Das Gel mit den Proben muss in den Elektrophoresebehälter gegeben werden, der die spezifische Pufferlösung enthält, und dann wird das Gerät eingeschaltet, so dass elektrischer Strom und folglich eine Potentialdifferenz vorhanden sind, die für die Trennung wichtig ist Partikel nach ihrer Belastung und Größe. Die elektrophoretische Laufzeit variiert je nach Ziel des Verfahrens und kann bis zu 1 Stunde dauern.
Nach der festgelegten Zeit ist es möglich, das Ergebnis des elektrophoretischen Durchlaufs durch den Transilluminator anzuzeigen. Wenn das Gel unter UV- oder LED-Licht gesetzt wird, kann das Bandenmuster sichtbar gemacht werden: Je größer das Molekül ist, desto kleiner ist seine Migration und nähert sich der Vertiefung. Je leichter das Molekül ist, desto größer ist das Migrationspotential.
Für die Validierung der Reaktion ist es erforderlich, dass die Banden der Positivkontrolle sichtbar gemacht werden und dass in der Negativkontrolle nichts sichtbar gemacht wird, da dies ansonsten ein Hinweis darauf ist, dass eine Kontamination vorliegt, und der gesamte Vorgang wiederholt werden muss.
Arten der Elektrophorese
Die Elektrophorese kann für verschiedene Zwecke durchgeführt werden, und je nach Zweck können verschiedene Arten von Gelen verwendet werden, wobei Polyacrylamid und Agarose am häufigsten sind.
Die Elektrophorese zur Identifizierung von Mikroorganismen wird häufiger in Forschungslabors durchgeführt. Zu diagnostischen Zwecken kann die Elektrophorese jedoch zur Identifizierung von hämatologischen Erkrankungen und Krankheiten verwendet werden, die sich mit zunehmender Proteinmenge entwickeln und die Hauptarten der Elektrophorese darstellen ::
1. Hämoglobinelektrophorese
Die Hämoglobinelektrophorese ist eine Labortechnik, die durchgeführt wird, um die verschiedenen Arten von Hämoglobin zu identifizieren, die im Blut zirkulieren, und die es ermöglicht, das Vorhandensein von Krankheiten im Zusammenhang mit der Hämoglobinsynthese zu identifizieren. Die Art des Hämoglobins wird mittels Elektrophorese bei einem spezifischen pH-Wert, idealerweise zwischen 8,0 und 9,0, identifiziert, wobei ein Muster von Banden verifiziert wird, das mit dem normalen Muster verglichen werden kann, wodurch das Vorhandensein abnormaler Hämoglobine identifiziert werden kann.
Wofür es gemacht ist: Die Hämoglobin-Elektrophorese wird durchgeführt, um Krankheiten im Zusammenhang mit der Hämoglobinsynthese zu untersuchen und zu diagnostizieren, wie Sichelzellenanämie und Hämoglobin-C-Krankheit, und um die Thalassämie zu differenzieren. Erfahren Sie, wie Sie die Hämoglobin-Elektrophorese interpretieren.
2. Proteinelektrophorese
Die Proteinelektrophorese ist eine vom Arzt angeforderte Untersuchung, um die Menge der im Blut zirkulierenden Proteine zu bestimmen und damit Krankheiten zu identifizieren. Dieser Test wird aus einer Blutprobe durchgeführt, die zentrifugiert wird, um das Plasma zu erhalten, wobei der Teil des Blutes unter anderem aus Proteinen besteht.
Nach der Elektrophorese kann ein Muster von Banden sichtbar gemacht werden und anschließend ein Diagramm, in dem die Menge jeder Proteinfraktion angegeben ist, was für die Diagnose von grundlegender Bedeutung ist.
Wofür es gemacht ist: Die Proteinelektrophorese ermöglicht es dem Arzt, das Auftreten von multiplem Myelom, Dehydration, Zirrhose, Entzündung, Lebererkrankung, Pankreatitis, Lupus und Bluthochdruck anhand des Bandenmusters und der im Untersuchungsbericht dargestellten Grafik zu untersuchen.
Verstehen Sie, wie es gemacht wird und wie Sie das Ergebnis der Proteinelektrophorese verstehen.
